柔佛海峽(英语:Straits of Johor;马来语:Selat Johor,别称地不佬海峡)是新加坡和馬來西亞柔佛州之间水道,东连南海,西通馬六甲海峽。海峽長52公里,寬1至5公里。有一條1056米長的新柔長堤連接兩岸。在二战期間,英軍曾炸毀該長堤,防止日軍通過海峽,入侵新加坡。
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新加坡和馬來西亞在1995年8月簽訂協議,劃分柔佛海峽水域的國界。在此之前,兩國按照1927年海峽殖民地與柔佛領土水域協議書所劃定的一條“假想線”,作为柔佛海峽水域上的國界。