User:Kaguya-Taketori/MC
維基百科,自由的 encyclopedia
分子克隆(Molecular Cloning)是一種分子生物學的常用技術。分子克隆的克隆字面意思是「複製」,在分子克隆中專指產生一群含有目的載體的宿主細胞[1]。
分子克隆可分爲兩個主要步驟:先構建重組DNA(即目的載體。重組意指DNA分子的擁有來源不同的幾個部分),再利用宿主細胞對構建的載體進行複製。分子克隆中最常用的載體和宿主細胞分別是質粒(plasmid)以及大腸桿菌(E. coli)。該技術路線操作簡便,且細菌繁殖極快,可以在短期內收穫大量重組DNA分子。理論上,該路線僅需要不到一週時間就可以完成。但質粒和大腸桿菌的組合也存在一定的侷限性。比如,質粒一般來說只能允許10kb以下的目的片段插入,因而根據情況可能需要使用λ噬菌體(英语:Lambda phage)、黏粒、酵母人工染色体(YAC)等載體[2]。
分子克隆是基因工程的重要一環,在生命科學研究中具有重要地位,許多研究在不使用分子克隆技術將難以進行。分子克隆是RNA干擾、基因敲除/敲入、基因編輯等技術的基礎。除了用於基礎研究外,生產重組蛋白、構建轉基因生物、實行基因治療也需要用到分子克隆技術。另外,在農業、法醫、考古等領域,分子克隆也扮演着重要的角色。